BONIFARM
Bonifarm title w

ALEX2 Molekularna/komponentna dijagnostika alergija pomoću multipleks tehnologije

mag.med.biochem. Željkica Jakoplić, siječanj 2026.

Alergije ALEX2

ŠTO JE ALERGIJA?

_

Alergija je preosjetljivost imunološkog sustava na inače bezopasne tvari koje nazivamo alergeni kao što su pelud, grinje, dlaka životinja, hrana ili lijekovi, što rezultira abnormalnom i neprimjerenom reakcijom tijela, kao što su kihanje, svrbež, osip ili suzenje očiju, a može varirati od blagih do po život opasnih stanja (anafilaksija). Najčešći uzroci su genetska predispozicija i izloženost okolišu, a prevencija i liječenje uključuju izbjegavanje alergena i odgovarajuću terapiju.

  • Najčešći simptomi alergija:
  • Nos i dišni putevi: kihanje, curenje bistre sluzi, začepljen nos, svrbež nosa, grebanje u grlu, kašalj, bolovi u sinusima, svrbež ili peckanje u ustima
  • Oči: svrbež, crvenilo, suzenje i oticanje očiju
  • Koža: svrbež kože, koprivnjača/urtikarija/osip, suha, crvena i ljuskava koža, mjehurići, ekcem
  • Probava (kod alergije na hranu): mučnina, povraćanje, bolovi u trbuhu, grčevi u trbuhu, proljev
  • Teški simptomi (anafilaksija - hitno stanje): otežano disanje i gutanje, oticanje grla i jezika, promuklost, pad krvnog tlaka, ubrzan/slab puls, vrtoglavica, zbunjenost, gubitak svijesti

Klimatske promjene, izloženost okolišnim čimbenicima i suvremeni stil života značajno doprinose stalnom porastu alergijskih bolesti. Prvi se simptomi pojavljuju u sve ranijoj životnoj dobi, često već u djetinjstvu i adolescenciji. Osim stalnog porasta prevalencije alergijskih bolesti, dijagnostički izazov predstavlja i sve veća složenost obrazaca senzibilizacije: polisenzibilizacije, križne reakcije i nespecifične kombinacije simptoma koje često otežavaju postavljanje jasne dijagnoze.

LABORATORIJSKA DIJAGNOSTIKA ALERGIJA

_

Kada osoba koja je sklona alergijama dođe u kontakt s alergenom, njezin imunološki sustav ga pogrešno prepoznaje kao opasnog napadača i počinje proizvoditi specifična protutijela, najčešće IgE klase (imunoglobulin E).

U suvremenoj laboratorijskoj dijagnostici, mjerenje IgE antitijela (ukupni + alergen specifični) iz krvi uz Prick test ključno je za potvrdu alergijske preosjetljivosti. Osim za dijagnostiku, iste pretrage koriste se i za praćenje uspješnosti liječenja. Negativan rezultat laboratorijske pretrage, ako postoji opravdana klinička sumnja na alergijsku reakciju, uvijek treba potvrditi ponovljenom pretragom. Rezultat laboratorijske pretrage unutar granica referentnog intervala ili preporučenih vrijednosti ne isključuje alergijske reakcije, a pozitivan rezultat ne mora biti u skladu s trenutačnom kliničkom slikom alergijske bolesti.

  • Dijagnostika

1. Ukupni IgE: Ovaj test mjeri ukupnu koncentraciju svih IgE antitijela u serumu. Koristi se za određivanje mehanizma alergijske reakcije te praćenje uspješnosti liječenja. Ograničenje takvog testiranja je što povišene vrijednosti ne znače nužno alergiju. Povišene vrijednosti uIgE mogu se naći kod bronhopulmonarne aspegiloze, parazitarnih i infektivnih bolesti (tuberkuloza, infektivna mononukleoza), u malignim bolestima te kod imunodeficijencija (sindrom hiper-IgE).

2. Alergen specifični IgE: Ovaj test mjeri antitijela usmjerena točno protiv određenog alergena (npr. peludi ambrozije, grinja ili bjelanjka jajeta) te precizno identificira na što je pacijent senzibiliziran. Za razliku od kožnih testova, sIgE se može mjeriti bez obzira na uzimanje antihistaminika ili stanje kože (npr. kod teškog dermatitisa). Pouzdanost određivanja sIgE najbolja je ako se krv uzorkuje u razdoblju od 2 tjedna do najviše 6 mjeseci nakon pojave alergijskih simptoma odn. izloženosti alergenu što je posebno važno za sezonski izražene alergene, lijekove i otrove opnokrilaca. Pri sumnji na alergene iz hrane, krv treba uzorkovati prije isključivanja određene namirnice iz prehrane.

3. Kompletna krvna slika (KKS): Povećan broj eozinofilnih granulocita odn. poznavanje njihovog broja može pomoći u prosuđivanju trenutačne izloženosti alergenu, određivanju mehanizama alergijske reakcije te fenotipizaciji astme.

4. Eozinofilni kationski protein (ECP): je heterogena skupina molukula koja se nalazi u specifičnim granulama eozinofilnih granulocita te u manjoj količini u neutrofilnim granulocitima i monocitima. Povećane vrijednosti u serumu upućuju na akutnu izloženost alergenu i proporcionalne su jačini alergijske upale posebno u astmi pa se na temelju ECP-a procijenjuje težina bolesti i određuje terapija.

5. Kožna testiranja: U detekciji alergija između ostalog primjenjuje se i Prick test (kožni ubodni test) kojim se identificira tvar (alergen) koja pacijentu izaziva alergijsku reakciju. Izvođenje testa sastoji se od nanošenja kapljica alergena na kožu podlaktice, a zatim se na tim mjestima lancetom naprave površinski ubodi kako bi se osigurao unos sadržaja kapljice koji će kod preosjetljive osobe izazvati alergijsku reakciju. Postupak je bezbolan no može izazvati blagu nelagodu i svrbež. Test je pozitivan ako se pojavi kožna reakcija u obliku urtikarije oko testiranog alergena koja je veća od nanešene pozitivne kontrole. Najčešće se provodi test na inhalacijske i nutritivne alergene, a po potrebi i na konzervanse i aditive.

6. Specifični provokacijski testovi (inhalacijski, oralni): Inhalacijski provokacijski test može se obavljati inhaliranjem alergena u nos ili u pluća, a oralni provokacijski test obično se primjenjuje u dijagnostici alergijskih reakcija na hranu i lijekove. Ovakvi testovi su složeni te se zbog mogućih rizika moraju obavljati u specijaliziranim ustanovama pod nadzorom posebno educiranog osoblja.

7. MOLEKULARNA/KOMPONENTNA ALERGOLOGIJA (ALEX²):

Molekularna/komponentna dijagnostika alergija predstavlja najsuvremeniji pristup u alergologiji. Za razliku od klasičnih testova koji koriste cijele ekstrakte alergena, ova metoda analizira specifične molekule (proteine) unutar svakog alergena.

Ključne prednosti komponentne dijagnostike alergija:

  • Razlikovanje prave alergije od križne reakcije što omogućuje liječnicima da utvrde je li pacijent doista alergičan na određeni izvor (npr. brezu) ili reagira zbog sličnosti proteina s drugim izvorom.
  • Procjena rizika od anafilaksije: Identifikacijom specifičnih “stabilnih” proteina (poput kazeina u mlijeku ili Ara h 2 u kikirikiju) može se predvidjeti rizik od teških sistemskih reakcija.
  • Personalizirana terapija: Rezultati su ključni za precizno propisivanje alergen-specifične imunoterapije, jer potvrđuju točan uzročnik na koji tijelo treba razviti otpornost.

Multiplex alergološki test ALEX2 (Allergy Xplorer 2)

_

S testom ALEX2 (Allergy Xplorer 2) paralelnom analizom ukupnog IgE i specifičnog IgE na razini ekstrakata i komponenti alergena mogu se otkriti senzibilizacije na gotovo 100 % globalno relevantnih alergena, a individualni profil senzibilizacije može se precizno i sveobuhvatno okarakterizirati.

  • Načelo testa i metoda:

Alergološki test ALEX2 je multipleks imunotest temeljen na ELISA-i. Serum pacijenta nanosi se na makroarray čip obložen ekstraktima alergena i molekularnim komponentama alergena. IgE protutijela prisutna u serumu vežu se na imobilizirane alergene na čipu. Nakon inkubacije s detektorskim protutijelom označenim fluorescencijom, vezana IgE protutijela kvantitativno se mjere pomoću skenera i prikazuju kao koncentracije u kUA/l. Integrirana inhibicija križno-reaktivnih ugljikohidratnih determinanti (CCD-ova) smanjuje broj lažno pozitivnih nalaza i povećava dijagnostičku specifičnost.

Alex2 Uređaj
Alex2 Uređaji

ALEX2 test pruža sveobuhvatnu analizu alergijskih reakcija na 295 komponenti:117 alergena i 178 alergenih molekularnih komponenti iz skupine nutritivnih i inhalacijskih alergena te mjerenje ukupnog IgE. Test pruža uvid u veliki broj mogućih alergena pa tako nutritivni alergeni uključuju voće, orašasto voće, sjemenke, povrće, mlijeko, meso, jaja, začine, plodove mora i žitarice, dok inhalacijski alergeni uključuju grinje, gljivice, plijesni, pelud (pelud trava/korova, drveća), dlake životinja (kućnih ljubimaca i uzgajanih životinja), i otrove kukaca (vatreni mrav, pčelinji otrov, otrov stršljena).

DETALJAN POPIS ALERGENA I ALERGENIH KOMPONENTI – VIDI KRAJ TEKSTA

  • Interpretacija testa, prednosti i ograničenja:
  • Serološka dijagnostika alergija pomoću ALEX² treba se smatrati dopunom kliničkoj anamnezi i provokacijskim testovima. Ova se metoda obično koristi kao drugi korak kada standardni kožni (prick) testovi ili klasični IgE testovi iz krvi ne daju dovoljno jasnu sliku ili kada pacijent ima složene reakcije na više vrsta hrane i peludi.
  • Za testiranje nije potrebno biti natašte, a rezultati ne ovise o uzimanju antihistaminika.
  • Test detektira gotovo 300 alergena – omogućuje probir IgE reaktivnosti na najčešće alergene (117) i molekularne komponente (178) čime pokriva gotovo 100 % klinički relevantnih alergena širom svijeta uključujući rijetke i egzotične okidače.
  • Kombinacijom ekstrakata alergena i molekularnih komponenti mogu se precizno analizirati složeni alergološki profili.
  • Kombinirana analiza ukupnog IgE i specifičnog IgE, uz analizu molekularnih komponenti, omogućuje diferencirane podatke o kliničkoj relevantnosti i potencijalnoj težini alergijskih reakcija.
  • Integrirana inhibicija križno-reaktivnih ugljikohidratnih determinanti (CCD-ova) eliminira nespecifično vezanje IgE protutijela, čime se poboljšava dijagnostička specifičnost, a umanjuje broj lažno pozitivnih rezultata.
  • Brza i sveobuhvatna dijagnostika: Multiplex pristup zamjenjuje brojne pojedinačne testove, štedeći vrijeme i resurse, a istovremeno pruža cjelovit alergenski profil u jednom koraku – s detaljnom, individualiziranom interpretacijom nalaza.
  • Primjena multiplex alergološkog testa ALEX2 korisna je:
  • kada se sumnja na polisenzibilizaciju ili križnu senzibilizaciju
  • kod nejasnih ili kompleksnih kliničkih slika s mogućim alergijskim podrijetlom
  • za diferenciranu procjenu prije specifične imunoterapije
  • pri obradi male djece s ograničenim volumenom seruma

Liječenje alergija

_

Pri liječenju alergija valja razlikovati kratkotrajno liječenje (liječenje simptoma) od dugotrajnog liječenja (liječenje uzroka alergije). Kratkotrajno liječenje uključuje ​​lijekove koji mogu ublažiti simptome alergije. Na primjer, mogu se koristiti lokalno, posebni sprejevi za nos i kapi za oči ili sistemski antihistaminici u obliku tableta. Međutim, oni samo ublažavaju simptome, a ne liječe uzrok alergije. Dugotrajno liječenje uzroka alergije moguće je samo specifičnom imunoterapijom no specifična imunoterapija nije prikladna za sve oblike alergija i često traje nekoliko godina. Najvažnija komponenta u smanjenju stresnih simptoma alergije u svakodnevnom životu je izbjegavanje kontakta s alergenima, odnosno tvarima koje izazivaju alergiju.

Kako biste mogli izbjeći kontakt sa alergenima koji uzrokuju simptome, važno je detektirati o kojim se alargenima ili alergenim komponentama u Vašem slučaju radi. U Odjelu za laboratorijsku dijagnostiku Poliklinike Bonifarm osim ALEX² testa koji detektira gotovo 300 alergena i alergenih komponenti, možete odraditi i veliki broj drugih analiza povezanih uz alergije kao što su kompletna krvna slika (KKS), eozinofilni kationski protein (ECP), ukupni IgE, specifični IgE na pojedinačne alergene te panele specifičnih IgE na hranu (na 20 i 40 namirnica). Cijene te detaljan popis dostupnih pretraga možete pogledati na našem popisu pretraga ili se za informacije obratiti našem laboratoriju laboratorij@bonifarm.hr.

IZVORI:

DETALJAN POPIS ALERGENA I ALERGENIH KOMPONENTI KOJE JE MOGUĆE DETEKTIRATI TESTOM ALEX2

_

ALERGENE KOMPONENTE: polkalcin, profilin, PR-10, Ole e 1 obitelj, LTPs, skladišni proteini, lipokalin, NPC2, serumski albumin, parvoalbumin, tropomiozin, CCD, uteroglobin, arginin kinaza

PELUD TRAVA I KOROVA: prstasti troskot, engleski ljulj, bahia trava, livadna mačica, trska, kultivirana raž, oštrodlakavi šćir, ambrozija, divlji pelin, konoplja, bijela loboda, jednogodišnja resulja, zidna crkvina, uskolisni trputac, kalijska solnjača, kopriva

PELUD DRVEĆA: akacija, žljezdasti pajasen, joha, obična breza, dudovac, japanska kriptomerija, pelud lijeske, čempres, obična bukva, jasen, orah, planinski cedar, crvena murva, maslina, datula, javorolisna platana, crna topola, brijest

GRINJE: američka grinja iz kućne prašine, europska grinja iz kućne prašine, skladišne grinje, grinje roda Blomia, grinje roda Glycophagus domestica, grinje roda Lepidoglyphus destructor, grinje roda Tyrophagus putrescentiae

MIKROORGANIZMI I SPORE: gljivica roda Malessezia sympodialis, kvasci, plijesan roda Alternaria, plijesan roda Aspergilus, plijesan roda Cladosporium, plijesan roda Penicilium chrysogenum

MAHUNARKE: kikiriki, slanutak, soja, leća, bijeli grah, grašak

ŽITARICE: zob, quinoa, heljda, ječam, sjeme lupine, riža, proso, kultivirana raž, pšenica, pir, kukuruz

ZAČINI: paprika, kim, origano, peršin, anis, sjeme gorušice

VOĆE: kivi, papaja, naranča, dinja, smokva, jagoda, jabuka, mango, banana, avokado, trešnja, breskva, kruška, borovnica, vinova loza

POVRĆE: crveni luk, češnjak, celer, mrkva, krumpir, rajčica

ORAŠASTO VOĆE: indijski orah, brazilski oraščić, pekan orah, lješnjak, orah, makadamija orah, pistacio, badem

SJEMENKE: sjeme bundeve, suncokreta, maka, sezam

MLIJEKO: kravlje, devino, kozje, kobilje, ovčje

JAJA: bjelanjak, žumanjak

RIBA I PLODOVI MORA: haringa, rak, smeđi škamp, šaran, bakalar, jastog, škampe, lignja, plava dagnja, kamenica, školjka kapica, raža, losos, atlantska skuša, tuna, sabljarka

MESO: kućni zrikavac, govedina, konj, kokoš, purica, zec, ovca, svinja

OTROVI OPNOKRILACA: otrov vatrenih mrava, otrovi pčela, stršljena, ose, žohari

KUĆNI LJUBIMCI I ŽIVOTINJE: pas, urin psa, zamorac, mačka, domaći miš, epitel zeca, djungarijski hrčak, štakor, epitel koze, epitel konja, epitel ovce, svinja

OSTALO: lateks, krpelj goluba